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第八百八十五章 乌骨藤作用（第2页）

氯仿部位以氯仿一甲醇梯度洗脱，得到药物标志物1—3，经反复硅胶柱层析，分别得到化合物9（10毫克）、1（14毫克）、6（24毫克）。

乙酸乙酯部位以石油醚-丙酮梯度洗脱，得到流份实验标志物1～4，其中实验标志物1步硅胶柱层析，得到化合物1（65毫克）。

实验标志物3经反复硅胶柱层析和SephadexLH-20凝胶柱纯化，得到化合物7（35毫克）和8（26毫克）。

正丁醇部位以氯仿一甲醇梯度洗脱，得到流份实验标志物1～4，其中实验标志物1经反复硅胶柱层析，得到化合物5（51毫克）。

实验标志物4上ODS柱，甲醇一水梯度洗脱，再经SephadexLH-20凝胶柱纯化，得到化合物2（42毫克）、3（57毫克）、4（73毫克）。

既然我觉得它有用，那么我们采用抗肿瘤活性实验法进行实验。

首先，细胞接种用含百分之10胎牛血清的RPMI1640培养液培养MNK-45和SGC一7901，收集对数生长期细胞，消化后调整其悬液浓度，以每孔1×104个细胞接种于96孑L板，每孔200trL。

细胞培养将细胞板放人CO：孵箱中，在37摄氏度、百分之5CO，条件下培养24小时，当细胞达到80％～90％汇合度时，弃去培养基。

接下来，就是细胞给药。

我们将将样品用DMSO溶解后，按200、100、50、25、12．5克／毫升质量浓度加人细胞孔内，重复3批，并另加3孔作为阳性对照（5-氟尿嘧啶）组。

3孔作为DMSO对照组，每孔总体积100止，在酶联免疫检测仪上测定各孑L吸光度，计算细胞抑制率、

公式为抑制率=（1一加药细胞吸光度／对照细胞吸光度）×100％。

再采用Logit法计算IC。

然后是实验结果。

结构鉴定分别有化合物1：白色无定形粉末（甲醇）。

化合物2：白色粉末（氯仿），化合物3:针状结晶（甲醇）。

化合物4：黄色粉末（甲醇）。

化合物5：黄色针晶（甲醇）化合物6：黄色粉末（甲醇），化合物7：无色针状结晶（氯仿），化合物8：白色粉末（甲醇）。

我们这里能够看出，LC与谷甾醇对照品Rf值及颜色一致，混合熔点不下降，故鉴定该化合物为p一谷甾醇。

TLC与胡萝卜苷对照品Rf值及颜色一致，混合熔点不下降，故鉴定该化合物为胡萝卜苷。

还有就是抗肿瘤活性。

根据实验效果显示，山柰酚对MKN-45和SGC-7901的抑制作用较强，IC50分别为48．87。

这个结果，远远高于阳性对照（5-氟尿嘧啶）。

而山柰酚4—甲醚、乌骨藤苷H、I活性较强。

所以，我们能够清楚的得到了结果。

目前，关于乌骨藤提取物抗胃癌活性的报道主要集中在水提物和甾体化合。

而这一次的实验采用人胃癌细胞SGC7901和MKN45，对该植物中分得的化合物进行体外抗肿瘤活性实验，发现黄酮类成分山柰酚对两者均表现出明显的抑制作用。

我这一次的实验表明，其能够通过作用于SGC7901的活性氧代谢途径来诱发细胞溶血，从而产生抗增殖活性。

当然，这一次尚无对MKN45作用机制进行研究，故需要更深入的探索，以期为开发利用乌骨藤提供科学依据。

这项研究，单凭我一个人肯定是难以完成的，所以，我想要……”

还没有等钟医说完，甚至钟医都没有没有表达出什么想法的时候，一个声音急迫的表示了自己的意愿。

“我可以！

我真的可以！

钟医，我可以帮你，不，我可以给你打下手，进行这些实验标志物的进一步开发。”

杨光毫不犹豫地表达道。

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